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2:estudo do potencial de membrana mitocondrial em ratos cirróticos hepatectomizados após aplicaçăo de laser1
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7:resumo: através da determinaçăo do potencial de membrana mitocondrial, o presente estudo relata os efeitos da irradiaçăo laser sobre o estado energético do fígado cirrótico de ratos hepatectomizados. a cirrose hepática foi induzida por ligadura do ducto biliar comum. os resultados revelaram melhora do status energético do fígado após irradiaçăo.
8:descritores: cirrose hepática, hepatectomia, laser, potencial de membrana mitocondrial.
9-key words: hepatic cirrhosis, hepatectomy, laser, mitochondrial membrane potential.
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12:introduçăo: a cirrose hepática é definida histologicamente pela existęncia de nódulos de regeneraçăo circundados por tecido fibroso distorcendo completamente a arquitetura parenquimatosa. constitui o estádio final, irreversível e comum de elevado número de hepatopatias crônicas de várias etiologias. a ressecçăo sobre fígados cirróticos ainda é bastante temida apesar dos avanços técnicos, pois ao contrário de fígados normais, na cirrose hepática há diminuiçăo da capacidade de regeneraçăo hepática e do grau de reserva funcional o que conduz a uma limitaçăo cirúrgica pois obriga a uma reduçăo na amplitude das ressecçăo6. foi demonstrado que a irradiaçăo laser em fígados normais de ratos hepatectomizados elevou a taxa mitótica deste órgăo.1,2 este processo năo foi elucidado em animais cirróticos. o laser é um sistema que amplifica a intensidade de luz, produzindo um feixe forte altamente direcionado com comprimento de onda específico7. o interesse neste tema reside na possibilidade de aplicaçăo clínica complementar do laser para acelerar a regeneraçăo do fígado cirrótico na vigęncia de ressecçőes sobre o órgăo, tendo por finalidade maior o retorno funcional, sobretudo, e estrutural o mais precocemente possível. o objetivo deste estudo consiste na avaliaçăo da capacidade energética do fígado cirrótico após hepatectomia parcial através da determinaçăo do potencial de membrana mitocondrial (pm).
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14:métodos: ratos wistar machos (peso 200-250g) foram submetidos ŕ ligadura do ducto biliar por 4 semanas para obtençăo de cirrose biliar secundária. usou-se a técnica do enovelamento do ducto biliar comum: exposiçăo do ducto biliar seguida de ligadura a 3 mm acima da junçăo biliopancreática com 5 nós de fio prolene 5.0 (ethicon, ync) e com o mesmo fio enovelando-se o ducto biliar comum em direçăo ascendente até 5mm da bifurcaçăo, finalizada por uma ligadura adicional com 5 nós. com esta técnica de enovelamento do ducto biliar foram obtidas alteraçőes morfo-funcionais e bioquímicas compatíveis com obstruçăo biliar crônica e lesăo hepática avançada. no pós-operatório os animais receberam vitamina k 15u, via subcutânea, a cada 3 dias. estudaram-se cinco grupos cn; cc; cl; ch; chl; respectivamente: controle normal; controle cirrótico; cirrótico irradiado; cirrótico hepatectomizado; cirrótico hepatectomizado e irradiado. após 4 semanas da obstruçăo, seguiu-se a segunda fase do experimento. nos grupos ch e chl realizou-se hepatectomia a 30%, com excisăo do lobo lateral esquerdo do fígado. nos grupos cl e chl procedeu-se a irradiaçăo hepática. usou-se laser vermelho, 630nm, 50mw/cm2 por 5 minutos. sacrifício e coleta de material se deu após 24h. o potencial de membrana (pm) foi determinado espectrofluoroscopicamente4 usando-se safranina o como indicador em fluorímetro slm aminco dw2000, comprimentos de onda de 495 nm para excitaçăo e 586 nm para emissăo.
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19:discussăo: a integridade do potencial da membrana mitocondrial corresponde diretamente a produçăo de energia. a transferęcia de elétrons ao longo da cadeia transportadora é acompanhada pela extrusăo de prótons transmembrana mitocondrial e a energia inerente nesta diferença de concentraçăo de prótons, a força próton-motora, representa uma conservaçăo de parte da energia da oxidaçăo, subseqüentemente usada na formaçăo de atp. foi postulado5 que a absorçăo de luz pela cadeia transportadora de elétrons causaria aumento da força próton-motora, aumentando o potencial de membrana mitocondrial, conseqüentemente o pool de atp. neste trabalho, confirmou-se o aumento do potencial de membrana no grupo hepatectomizado e irradiado (chl) em relaçăo aos demais.
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